4-Nitrophenyl beta-D-Glucuronide [Substrate for beta-Glucuronidase] TCI N0618

TCI N0618 4-Nitrophenyl beta-D-Glucuronide adalah substrat kromogenik untuk enzim beta-glukuronidase. Molekulnya terdiri atas asam glukuronat yang terikat melalui ikatan beta-glikosidik pada 4-nitrofenol. Saat beta-glukuronidase memutus ikatan tersebut, 4-nitrofenol dilepaskan dan memberikan warna kuning dalam suasana basa yang dapat diukur secara spektrofotometri. Substrat ini menjadi pilihan standar untuk menentukan aktivitas beta-glukuronidase dalam penelitian biokimia, mikrobiologi, farmakologi, dan bioteknologi tanaman.

Keunggulan substrat ini adalah pembacaan hasil yang sederhana, cepat, dan kuantitatif. Karena produk reaksi langsung berwarna, peneliti tidak memerlukan tahap derivatisasi tambahan. Spesifisitas terhadap ikatan beta-glukuronida membantu membedakan aktivitas beta-glukuronidase dari glikosidase lain. Enzim ini penting secara biologis karena terlibat dalam metabolisme konjugat glukuronida obat dan senyawa endogen, serta digunakan sebagai penanda untuk bakteri tertentu dan sebagai gen pelapor GUS dalam rekayasa tanaman. Semua hal ini menjadikan substrat ini alat ukur yang sangat berguna.

Di Indonesia, substrat ini dimanfaatkan oleh laboratorium bioteknologi tanaman yang melakukan transformasi genetik dengan penanda GUS, laboratorium mikrobiologi yang mempelajari bakteri penghasil beta-glukuronidase, serta laboratorium farmakologi yang meneliti metabolisme obat dan senyawa bahan alam. Kemasan 100mg sesuai untuk kebutuhan uji enzim skala analitik, karena reaksi kromogenik umumnya hanya memerlukan jumlah substrat yang kecil untuk setiap pengukuran.

• Uji aktivitas beta-glukuronidase: pelepasan 4-nitrofenol berwarna kuning memungkinkan pengukuran aktivitas enzim secara kuantitatif dengan spektrofotometer atau microplate reader.
• Uji gen pelapor GUS kuantitatif: pada tanaman transgenik, substrat ini membantu mengukur tingkat aktivitas GUS sebagai indikator ekspresi gen atau keberhasilan transformasi.
• Kajian metabolisme konjugat glukuronida: peneliti farmakologi dapat menilai aktivitas enzim pendekonjugasi dari jaringan, mikrobiota usus, atau sediaan enzim komersial.
• Karakterisasi mikroba: aktivitas beta-glukuronidase merupakan ciri biokimia bakteri tertentu sehingga substrat ini membantu identifikasi dan studi fisiologi isolat.
• Penapisan inhibitor beta-glukuronidase: ekstrak bahan alam dapat diuji kemampuan hambatnya karena penurunan warna kuning langsung mencerminkan penurunan aktivitas enzim.

Simpan substrat dalam wadah aslinya yang tertutup rapat, terlindung dari cahaya, kelembapan, dan panas, mengikuti suhu penyimpanan yang tertera pada label TCI. Paparan lembap dapat memicu hidrolisis spontan yang meningkatkan warna latar belakang. Biarkan wadah mencapai suhu ruang sebelum dibuka agar tidak terjadi pengembunan di dalamnya. Siapkan larutan kerja secukupnya dan gunakan dalam waktu singkat. Kenakan sarung tangan, kacamata pengaman, dan jas laboratorium, serta baca SDS sebelum digunakan.

• Yan dkk. (2011). Prediction of Michaelis-Menten Constant of Beta-Glucosidases Using Nitrophenyl-beta-D-Glucopyranoside as Substrate. Protein & Peptide Letters doi:10.2174/092986611796378747
• KINOSHITA (1997). Analytical Chemistry in Medical Science and Technology. Amperometric determination of .BETA.-glucuronidase based on a measurement of p-nitrophenol released from p-nitrophenyl-.BETA.-glucronide using a dialysis membrane-covered electrode.. BUNSEKI KAGAKU doi:10.2116/bunsekikagaku.46.987

Referensi dihimpun otomatis dari Crossref dan setiap DOI diverifikasi keberadaannya. AMI Scientific tidak berafiliasi dengan penulis maupun penerbit.