3,3'-Diaminobenzidine Tetrahydrochloride Hydrate [for Biochemical Research] TCI D3757

Deskripsi

3,3'-Diaminobenzidine Tetrahydrochloride Hydrate adalah bentuk garam tetrahidroklorida terhidrat dari DAB yang disiapkan untuk penelitian biokimia dan dikelompokkan sebagai produk penunjang kerja antibodi. Sama seperti basa bebasnya, senyawa ini berfungsi sebagai substrat kromogen bagi enzim peroksidase, khususnya *horseradish peroxidase* yang ditempelkan pada antibodi sekunder. Ketika enzim bekerja dengan bantuan hidrogen peroksida, DAB dioksidasi dan mengendap sebagai produk berwarna cokelat yang tidak larut, sehingga posisi antigen pada jaringan atau pita protein pada membran dapat terlihat langsung oleh mata maupun mikroskop cahaya biasa.

Keunggulan bentuk garam tetrahidroklorida terletak pada kemudahan penanganannya. Sebagai garam, senyawa ini jauh lebih mudah larut dalam air dan bufer berair dibandingkan basa bebasnya, sehingga larutan kerja dapat disiapkan cepat tanpa pelarut organik tambahan. Bentuk garam ini juga umumnya lebih stabil terhadap oksidasi selama penyimpanan, sehingga risiko penggelapan bahan sebelum dipakai dapat ditekan. Sifat produk akhirnya tetap sama menguntungkan: endapan cokelat yang terbentuk melekat kuat dan tahan terhadap dehidrasi serta penjernihan, sehingga preparat dapat diawetkan secara permanen. Kombinasi kelarutan, kestabilan, dan hasil pewarnaan yang tegas inilah yang membuatnya menjadi pilihan rutin pada alur kerja imunohistokimia.

Laboratorium patologi anatomi, laboratorium imunologi, laboratorium riset biomedis, dan laboratorium diagnostik hewan di Indonesia banyak menggunakan pereaksi ini sebagai bagian dari rangkaian deteksi berbasis antibodi. Kemasan 1 g dan 5 g yang tersedia di AMI Scientific memudahkan penyesuaian dengan beban kerja: kemasan kecil bagi laboratorium riset dengan pemakaian berkala, kemasan besar bagi laboratorium yang menjalankan pewarnaan dalam jumlah banyak dan ingin menjaga keseragaman bahan dari satu lot.

Aplikasi Laboratorium

• Deteksi imunohistokimia dengan konjugat peroksidase, karena garam DAB mudah dilarutkan dalam bufer berair untuk membentuk larutan kromogen kerja yang seragam.
• Pewarnaan blot protein secara kromogenik, sebab endapan cokelat yang terbentuk melekat kuat pada membran dan dapat didokumentasikan tanpa peralatan pencitraan mahal.
• Hibridisasi in situ berlabel peroksidase, mengingat sinyal berwarna yang dihasilkan tahan proses dehidrasi sehingga preparat dapat diawetkan secara permanen.
• Uji dan penapisan aktivitas peroksidase, karena laju pembentukan warna mencerminkan kerja enzim sehingga cocok untuk pemantauan reaksi dan optimasi kondisi.
• Pengembangan protokol pewarnaan multi-label, sebab warna cokelat DAB memberi kontras jelas terhadap kromogen lain maupun pewarnaan latar hematoksilin.

Spesifikasi

• Merek: TCI (kode katalog D3757), kualitas untuk penelitian biokimia
• Nomor CAS: 868272-85-9
• Kategori: Life Science > Antibodies > Antibody Supplementary Products
• Varian/kemasan: 1 g dan 5 g
• Bentuk fisik: padatan garam tetrahidroklorida terhidrat, larut dalam air
• Catatan penyimpanan: simpan tertutup rapat, terlindung dari cahaya dan kelembapan, pada kondisi yang tertera di label pemasok

Penanganan dan Penyimpanan

Simpan bahan dalam wadah asli yang tertutup rapat, terlindung dari cahaya dan kelembapan, di tempat penyimpanan sesuai keterangan pemasok; karena bentuk terhidrat dapat menyerap uap air, biarkan wadah mencapai suhu ruang sebelum dibuka agar tidak terjadi pengembunan di dalam kemasan. Lakukan penimbangan di lemari asam dengan sarung tangan sekali pakai, kacamata pelindung, masker, dan jas laboratorium, serta hindari terbentuknya debu halus. Siapkan larutan kerja segar, saring bila perlu, dan gunakan pada hari yang sama untuk hasil pewarnaan terbaik. Kumpulkan seluruh larutan sisa dan bahan yang terkontaminasi pada wadah limbah khusus berlabel, jangan dialirkan ke saluran pembuangan.

English

3,3'-Diaminobenzidine Tetrahydrochloride Hydrate (CAS 868272-85-9) from TCI is a biochemical-research grade chromogen supplied in 1 g and 5 g packs as an antibody supplementary product. Compared with the free base, the tetrahydrochloride salt dissolves readily in water and aqueous buffers and is generally more storage-stable against oxidation, so working chromogen solutions can be prepared quickly without organic solvents. In the presence of horseradish peroxidase and hydrogen peroxide it is oxidised to an insoluble brown precipitate that marks the enzyme location precisely and survives dehydration, clearing, and permanent mounting. It is therefore a routine reagent for immunohistochemistry, chromogenic western blotting, in situ hybridisation, peroxidase activity assays, and multi-label staining protocols. Weigh in a fume hood, prepare solutions fresh, and collect waste separately.

Referensi Ilmiah

• (2006). 3,3′-Diaminobenzidine tetrahydrochloride (DAB). Cold Spring Harbor Protocols doi:10.1101/pdb.caut307
• Thomas dkk. (2005). HistoGreen: a new alternative to 3,3′-diaminobenzidine-tetrahydrochloride-dihydrate (DAB) as a peroxidase substrate in immunohistochemistry?. Brain Research Protocols doi:10.1016/j.brainresprot.2004.12.002
• (2006). DAB (3,3′-Diaminobenzidine tetrahydrochloride). Cold Spring Harbor Protocols doi:10.1101/pdb.caut293

Referensi dihimpun otomatis dari Crossref dan setiap DOI diverifikasi keberadaannya. AMI Scientific tidak berafiliasi dengan penulis maupun penerbit.